Gå till innehåll
 
Internationella Parkinson- och rörelsestörningssällskapet

De tidigare, nuvarande och framtida rollerna för α-synukleinfröamplifieringsanalyser

Datummaj 2024
författare: Omar El-Agnaf, PhD; Ilham Abdi, PhD; Nobutaka Hattori, MD, PhD, FANA; Tiago Outeiro, PhD.
redaktörer: Lorraine Kalia, läkare, PhD; Daniela Berg, läkare, PhD; Jeffery H. Kordower, PhD 


Beskrivning

Fröamplifieringsanalyser (SAA), även kända som realtidsskakningsinducerad konvertering (RT-QuIC) eller cyklisk proteinmisveckningsamplifiering (PMCA), utvecklades ursprungligen för att detektera den infektiösa formen av prionprotein vid Creutzfeldt-Jakobs sjukdom (CJD) (Figur 1).1 Med den framgångsrika utvecklingen av SAAs som ett diagnostiskt test för Creutzfeldt-Jakobs-Jakob,2 SAA:er anpassades för detektion av sjukdomsassocierat α-synuklein (α-syn). Några ändringar i analysprotokollet inkluderade sänkning av buffertens surhetsgrad och temperatur, där en av de viktigaste förändringarna var tillsatsen av kulor under jordbävningsprocessen. α-Syn SAA:er rapporterade först framgång i detektionen av aggregerad α-syn hos patienter med Lewykroppsdemens (DLB) och Parkinsons sjukdom (PD) år 2016. Sedan dess har analysen replikerats över hela världen i hopp om att förbättra känsligheten och specificiteten för detektion av synukleopati inom olika biofluider och vävnader. År 2023 var forskare som använde en modifierad α-syn SAA de första att rapportera differentiering mellan PD- och MSA-patienter, vilket är ett lovande nästa steg för utvecklingen av α-syn SAA.9 Diskussionen nedan fördjupar sig i det nuvarande läget för α-syn-tillämpningen med insikter från experter inom området om praktiska tillämpningar, viktig utveckling och framtida förhoppningar för α-syn SAA:er.

Figur 1: Historisk tidslinje för utveckling av α-syn-fröamplifieringsanalys.

 

 

Artikelöversikt

Hoppa till: 

 

Hur utförs SAA:er i labbet och vad mäter de? Vilket biomaterial anses för närvarande vara användbart? 

Professor Outeiro:

α-Syn SAA:er utförs genom att blanda material från människor med rekombinant framställt, monomeriskt α-syn (används som substrat) i en 96-brunnsplatta under omrörning vid 37ºC. För närvarande anses cerebrospinalvätska (CSF) och blod vara de biomaterial som anses vara mest användbara, men andra biomaterial som saliv, urin, hudhomogenat, näsprover eller avföring kan också visa sig användbara i framtiden, i takt med att nya versioner av protokollen dyker upp (Figur 2). 

Dr. El-Agnaf och Dr. Abdi:

Proteinopatier involverar patologisk aggregering av felveckade proteiner, vilka kan fungera som frön för att främja felveckning och aggregering av samma nativa proteiner.12 Vid synukleinopatier, en typ av proteinopati, är aggregering av α-syn-protein ett kännetecken för sjukdomen. Det finns tre huvudtyper av synukleinopatier: Parkinsons sjukdom, Lewykroppsdemens (DLB) och multipel systematrofi (MSA), där de två första huvudsakligen är en neuronal synukleinopati och den senare primärt en oligodendroglial synukleinopati.13

SAA:er är specifikt utformade för att detektera dessa aggregat med hög känslighet och specificitet. De utnyttjar denna såddmekanism genom att blanda en liten mängd biologiskt prov som innehåller felveckade α-syn, eller "α-syn-frön", med ett stort överskott av deras lösliga, monomera α-syn.14 Amplifieringsprocessen involverar cykler av inkubation och omrörning eller sonikering för att främja den snabba multiplikationen av dessa frön. Denna interaktion underlättar amplifieringen av de felveckade proteinaggregaten, vilket möjliggör detektion av mycket låga nivåer av patologiska proteiner. Aggregeringen av α-syn övervakas över tid, vanligtvis genom att mäta fluorescensintensiteten hos ett tillsatt färgämne, Th-T, som binder specifikt till de bildade amyloidfibrillerna som innehåller β-arkstrukturer "aggregat". Ökningen av fluorescens över tid indikerar bildandet av α-syn-aggregat. Reaktionens kinetik, som återspeglas i tillväxtkurvan för fluorescensintensitet, kan ge information om såddpotensen hos de felveckade proteinerna som finns i det ursprungliga biologiska provet. 3,15 

SAA-arbete som utförts för synukleinopatier, särskilt PD, har gjort stora framsteg under det senaste decenniet med utvecklingen av SAA:er för olika biomaterial.5,16 Det mest använda och informativa biomaterialet är CSF på grund av dess nära kontakt med hjärnan.17 Inkluderingen av olika biofluider och vävnader i SAA har varit ett betydande fokus i senare studier, där många utökar omfattningen till att omfatta luktslemhinnor och hudvävnader, och rapporterar lovande resultat som understryker analysens anpassningsförmåga och potential att förbättra diagnostisk precision och bekvämlighet.18,19 Nyare arbete har undersökt användningen av SAA genom att införliva ett immunoprecipitationssteg som först isolerar den felveckade α-syn från blodet och sedan applicerar den på SAA.9 

Dr. Hattori:

Det används för tidig diagnos av Parkinsons sjukdom och differentialdiagnos. Det mest användbara är inriktat på generella tester, och vi anser att det är viktigt att mäta det i blod. SAA har äntligen "lagt grunden för den biologiska diagnosen av Parkinsons sjukdom", och det har gjort det möjligt att upptäcka sjukdomen redan innan några kliniska eller fysiska förändringar upptäcks. 9,21 Insamling av CSF eller hudbiopsi är dock mer betungande än konventionella testmetoder, och utveckling av blodprover och andra mindre betungande metoder kan vara nödvändig för att sprida användningen av α-syn SAA som en ledtråd för att upptäcka PD. 

Figur 2: Schematisk bild av α-syn-fröamplifieringsanalysen. Skapad med Biorender.com.

 

Vilken roll spelar stabiliseringsåtgärder (SAAs) för närvarande i klinisk praxis? Hur bör de tillämpas för personer med åderbråck, personer med etablerad Parkinsons sjukdom och personer med parkinsonism med en diagnos?

Dr. El-Agnaf och Dr. Abdi:

SAA:er har framstått som viktiga verktyg inom klinisk forskning om Parkinsons sjukdom och relaterade sjukdomar. Även om de visar stort potential i forskningsmiljöer har SAA:er ännu inte uppnått godkännande för klinisk diagnostisk användning. En betydande utveckling inom detta område är dock den kommersiella tillgängligheten av SYNTap® Biomarker Test i USA. Detta test, utvecklat av Amprion, en pionjär inom SAA-teknik, markerar ett betydande steg framåt i tidig upptäckt av Parkinsons sjukdom och relaterade sjukdomar. Även om det inte är universellt godkänt för klinisk diagnostik har vissa kliniker, som Mayo Clinic, börjat införliva SYNTap-testet som ett kompletterande verktyg i sina diagnostiska processer.20 Denna användning belyser det växande erkännandet av SAA:s potential att förbättra klinisk förståelse och patientvård vid neurodegenerativa sjukdomar.

Den betydelsefulla studien Parkinson's Progression Markers Initiative (PPMI) av Siderowf et al. utmärker sig som den största analysen hittills som använt SAA, vilket markerar ett betydande språng i vår förståelse av dess diagnostiska prestanda. Studien, som involverade hela 1123 deltagare, visade en sensitivitet på 87.7 % och en specificitet på 96.3 % för Parkinsons sjukdom, och belyste dess roll i att förstå sjukdomens molekylära heterogenitet och identifiera prodromala individer.21

SAA:er kan vara särskilt värdefulla för tidig upptäckt av α-syn-aggregat hos individer som riskerar att utveckla synukleinopatier, såsom de med REM-sömnbeteendestörning (RBD) eller hyposmi, vilket framgår av flera studier.21-24 Att tidigt identifiera dessa aggregat kan bidra till att stratifiera risknivåer för att utveckla PD eller relaterade sjukdomar, vilket underlättar noggrannare övervakning och tidiga interventionsstrategier. PPMI-studien belyste SAA:s förmåga att skilja PD från friska kontroller och ytterligare förfina diagnosen bland dem med parkinsonismsymtom, inklusive de med och utan genetiska varianter associerade med PD. SAA har också förmågan att skilja mellan PD, DLB och MSA från icke-synukleinopatier i parkinsonismen, såsom progressiv supranukleär pares (PSP) och kortikobasal degeneration (CBD).25 Detta underlättar korrekt diagnos och lämplig behandling av dessa tillstånd. Ytterligare forskning och klinisk validering i mer longitudinella och diversifierade kohorter av neurodegenerativa sjukdomar är nödvändig för korrekt differentialdiagnos och för att förstå sjukdomens underliggande patologi. Detta skulle möjliggöra integrering av SAA:er i rutinmässig klinisk praxis och ge viktig vägledning för behandlingsbeslut.

Professor Outeiro:

SAA:er är värdefulla för att fastställa förekomsten av såddförmåga hos individer. Enligt nya data verkar det som att individer med RBD redan uppvisar SAA-positiva signaler även om de inte uppvisar kliniska drag av motorfasen av PD. SAA:er kan vara mycket användbara för att klassificera individer enligt deras α-syn-status.

Dr. Hattori:

Beträffande RBD-patienter är den allmänna uppfattningen att de är en riskgrupp för synukleopati. Därför är det viktigt att verifiera hur snart fenokonversion sker efter ett positivt resultat med hjälp av SAA i kombination med immunoprecipitation. När detta har verifierats kommer tidpunkten för tidig intervention att bestämmas. Vi tror också att det hos etablerade PD-patienter kommer att vara möjligt att fastställa sambandet mellan SAA-resultat och progressionshastigheten av kliniska symtom. Som ett validerat test kan det differentiera Parkinsonism, som inte är en synukleopati. Dessutom kommer kliniska prövningar som endast riktar sig mot synukleopati att genomföras, och mer precisionsmedicin kommer att förverkligas.

VIKTIG VARNING: SAA:er används för närvarande i klinisk forskning och har ännu inte verifierats som ett diagnostiskt verktyg för prodromal PD. Se dessa resurser för mer information om de etiska utmaningarna med att använda SAA:er i klinisk praxis. 

Patienters syn på de etiska utmaningarna med tidig upptäckt av Parkinsons sjukdom. Schaeffer E, Rogge A, Nieding K, Helmker V, Letsch C, Hauptmann B, Berg D.Neurology. 2020 maj 12;94(19):e2037-e2044. doi: 10.1212/WNL.0000000000009400.  

Riskupplysning vid prodromal Parkinsons sjukdom. Schaeffer E, Toedt I, Köhler S, Rogge A, Berg D. Mov Disord. 2021 dec;36(12):2833-2839. doi: 10.1002/mds.28723. 

 

Vilka är de mest lovande utvecklingarna för denna metodik på gång? Vad krävs för att åstadkomma dessa utvecklingar?

Dr. Hattori:

Differentiering inom synukleinopati är nu möjlig. Vi anser att det är avgörande att etablera en enklare testmetod, om möjligt. Eftersom specifika synukleinfrön finns för varje synukleinopati kan vi också säga att produktionen av sjukdomsspecifika synukleinfröantikroppar kommer att vara tillgänglig, vilket leder till utveckling av sjukdomsspecifika antikroppsbehandlingar. 

Dr. El-Agnaf och Dr. Abdi:

Fördelarna med SAA är många. De ger en högre känslighet jämfört med andra diagnostiska metoder och kan upptäcka felveckade proteiner i tidiga sjukdomsstadier, vilket potentiellt bidrar till tidigare diagnos och intervention.19,26 Teknikens tillämpbarhet med en mängd olika biologiska prover ger också en värdefull fördel.18,19,27 Trots deras potential är SAA inte utan begränsningar. SAA har främst använts på ett kvalitativt sätt för att detektera förekomsten av felveckade α-syn-aggregat, vilket genererar binära resultat av positiva eller negativa för α-syn-frön. Kvantifiering av α-syn-frön i biologiska prover skulle ge värdefulla och noggranna insikter för diagnos och övervakning av synukleinopatier. I ett försök att tillhandahålla en mer direkt metod för att kvantifiera α-syn-frön har vår grupp nyligen etablerat en ny metod som kombinerar SAA och aggregatspecifik immunanalys för att ge en mätbar testavläsning som visar framgångsrik direkt kvantifiering av sådd α-syn i CSF-prover.28 Även om denna metod robust kvantifierade SAA-produkter från PD och DLB med hög specificitet och sensitivitet, är den metodologiska processen som helhet komplex på grund av att två separata analyser krävs för att generera slutresultat. Utveckling av en mer förenklad metod med samma koncept skulle vara av stort värde.  

Idén att integrera immunanalys med SAA har utforskats ytterligare av vår egen grupp och andra. I vårt arbete har vi omarbetat metoden att använda aggregatspecifik immunanalys tillsammans med SAA genom att utveckla en enda analys som effektivt amplifierar α-syn-frön och kvantifierar dem samtidigt (manuskript inskickat för publicering). Det finns också olika diagnostiska analyser, nyligen utvecklade av forskare från Brigham and Women's Hospital och Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering vid Harvard University, kallade digitala fröamplifieringsanalyser (dSAAs), som fungerar genom att isolera enskilda ⍺-synukleinaggregat i konstruerade mikrokompartments och odlas till större fluorescerande aggregat som blir lätt detekterbara och kvantifierbara.22 

Dessa ansträngningar, inriktade på att förfina SAA:er till att inte bara vara kvalitativa utan även kvantitativa verktyg, som kan mäta mängden sjukdomsspecifika proteinaggregat korrekt, är lovande utvecklingar som bör stödjas ytterligare. Att framgångsrikt validera dessa utvecklingar i större skala skulle kunna markera en viktig milstolpe i att integrera dem i klinisk praxis och kliniska prövningar, vilket i slutändan uppnår tidig och korrekt diagnos, vilket i slutändan förbättrar patientresultaten. 

Professor Outeiro:

Att öka analysens känslighet, göra SAA:er kvantitativa och anpassa SAA:er till mer tillgängliga humana biomaterial skulle vara viktiga framsteg. För att uppnå detta behöver vi ytterligare forskning för att identifiera analysförhållanden och substrat som förbättrar analysen.   

 

Hur ser du på tillämpningarna av SAA:er i framtida klinisk praxis och kliniska prövningar? 

Professor Outeiro:

Jag föreställer mig att SAA-status kommer att vara avgörande för att klassificera individer för kliniska prövningar, och även, möjligen, som en markör för målgruppens engagemang. 

Dr. Hattori:

Vi kan säga att det först och främst kan tillämpas inom precisionsmedicin. Att identifiera patienter med högre risk att utveckla sjukdomen är också möjligt genom en fysisk undersökning av riskgruppen. Som ett resultat kommer det att vara till hjälp för förebyggande medicin. 

Dr. El-Agnaf och Dr. Abdi:

Efter utveckling och validering av en kvantitativ SAA kan dess potentiella tillämpningar resultera i mer effektiva kliniska prövningar och utveckling av mer effektiva, personliga behandlingsstrategier.    

SAA skulle kunna möjliggöra detektion av PD, DLB och MSA innan kliniska symtom debuterar, vilket möjliggör interventioner i stadier då behandlingar är mer sannolikt effektiva. Denna tidiga diagnostiska förmåga skulle inte bara förändra patientvårdsstrategier utan också förfina patienturvalskriterierna för kliniska prövningar, vilket säkerställer att deltagarna diagnostiseras korrekt och befinner sig i rätt skede av sjukdomsprogressionen för att potentiella behandlingar ska ha maximal effekt. Genom att kvantifiera sjukdomsspecifika proteinaggregat skulle SAA dessutom kunna fungera som biomarkörer för att spåra sjukdomsprogression och respons på behandling, vilket erbjuder ett dynamiskt verktyg för att övervaka patientens hälsa över tid. I kliniska prövningar skulle detta kunna dramatiskt förbättra utvärderingen av terapeutisk effekt och ge tydliga, kvantifierbara effektmått som återspeglar förändringar i sjukdomens underliggande patologi.

 

Referensprojekt

  1. Wilham, JM, Orrú, CD, Bessen, RA, Atarashi, R., Sano, K., Race, B., Meade-White, KD, Taubner, LM, Timmes, A., & Caughey, B. (2010). Snabb slutpunktskvantifiering av prionsåddningsaktivitet med känslighet jämförbar med bioanalyser. PLoS pathogens, 6(12), e1001217. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1001217 

  1. Atarashi, R., Satoh, K., Sano, K., Fuse, T., Yamaguchi, N., Ishibashi, D., Matsubara, T., Nakagaki, T., Yamanaka, H., Shirabe, S., Yamada, M., Mizusawa, H., Kitamoto, T., McGlade, GJ, & Klug,, GJ. Nishida, N. (2011). Ultrakänslig mänsklig priondetektering i cerebrospinalvätska genom skavningsinducerad konvertering i realtid. Naturmedicin, 17(2), 175–178. https://doi.org/10.1038/nm.2294 

  1. Fairfoul, G., McGuire, LI, Pal, S., Ironside, JW, Neumann, J., Christie, S., Joachim, C., Esiri, M., Evetts, SG, Rolinski, M., Baig, F., Ruffmann, C., Wade-Martins, R., Hu, MT, Parkkinen, L., & Green, AJ (2016). Alfa-synuklein RT-QuIC i cerebrospinalvätskan hos patienter med alfa-synukleinopatier. Annals of clinical and translational neurology, 3(10), 812–818. https://doi.org/10.1002/acn3.338 

  1. Bongianni, M., Ladogana, A., Capaldi, S., Klotz, S., Baiardi, S., Cagnin, A., Perra, D., Fiorini, M., Poleggi, A., Legname, G., Cattaruzza, T., Janes, F., Tabaton, M., Ghetti, S., Ghetti, B., Ghetti, B., Pocchiari, M., & Zanusso, G. (2019). α-Synuclein RT-QuIC-analys i cerebrospinalvätska hos patienter med demens med Lewy-kroppar. Annals of clinical and translational neurology, 6(10), 2120–2126. https://doi.org/10.1002/acn3.50897 

  1. Rossi, M., Candelise, N., Baiardi, S., Capellari, S., Giannini, G., Orrù, CD, Antelmi, E., Mammana, A., Hughson, AG, Calandra-Buonaura, G., Ladogana, A., Plazzi, G., Cortelli, P., Caughey, B., &2020, B.). Ultrakänslig RT-QuIC-analys med hög sensitivitet och specificitet för Lewy-kroppsassocierade synukleinopatier. Acta neuropathologica, 140(1), 49–62. https://doi.org/10.1007/s00401-020-02160-8 

  1. Brockmann, K., Quadalti, C., Lerche, S., Rossi, M., Wurster, I., Baiardi, S., Roeben, B., Mammana, A., Zimmermann, M., Hauser, AK, Deuschle, C., Schulte, C., Waniek, K., Lachmann, I., Sjödin, S., Brinkmalm, A., Blennow, K., Zetterberg, H., Gasser, T., & Parchi, P. (2021). Samband mellan CSF-alfa-synuklein-såddaktivitet och genetisk status vid Parkinsons sjukdom och demens med Lewykroppar. Acta neuropathologica communications, 9(1), 175. https://doi.org/10.1186/s40478-021-01276-6 

  1. Poggiolini, I., Gupta, V., Lawton, M., Lee, S., El-Turabi, A., Querejeta-Coma, A., Trenkwalder, C., Sixel-Döring, F., Foubert-Samier, A., Pavy-Le Traon, A., Plazzi, G., Biscarini, F., Mont Gagnoir, J. F. RB, Antelmi, E., Meissner, WG, Mollenhauer, B., Ben-Shlomo, Y., Hu, MT, … Parkkinen, L. (2022). Diagnostiskt värde av kvantifiering av cerebrospinalvätska alfa-synukleinfrö vid synukleinopatier. Brain: a journal of neurology, 145(2), 584–595. https://doi.org/10.1093/brain/awab431 

  1. Kluge, A., Bunk, J., Schaeffer, E., Drobny, A., Xiang, W., Knacke, H., Bub, S., Lückstädt, W., Arnold, P., Lucius, R., Berg, D., & Zunke, F. (2022). Detektion av neuron-deriverat patologiskt α-synuklein i blod. Brain: a journal of neurology, 145(9), 3058–3071. https://doi.org/10.1093/brain/awac115 

  1. Okuzumi, A., Hatano, T., Matsumoto, G., Nojiri, S., Ueno, SI, Imamichi-Tatano, Y., Kimura, H., Kakuta, S., Kondo, A., Fukuhara, T., Li, Y., Funayama, M., Saiki, S., Taniguchi, D., T. Mc, In D. Gérardy, JJ, Mittelbronn, M., Kruger, R., Uchiyama, Y., … Hattori, N. (2023). Propagativa a-synukleinfrön som serumbiomarkörer för synukleinopatier. Naturmedicin, 29(6), 1448–1455. https://doi.org/10.1038/s41591-023-02358-9 

  1. Simuni, T., Chahine, LM, Poston, K., Brumm, M., Buracchio, T., Campbell, M., Chowdhury, S., Coffey, C., Concha-Marambio, L., Dam, T., DiBiaso, P., Foroud, T., Frasier, M., Gochanour, C., Jennings, D., Kieburtz, K., Kopil, CM, Merchant, K., Mollenhauer, B., Montine, T., … Marek, K. (2024). En biologisk definition av neuronal α-synukleinsjukdom: mot ett integrerat stadiesystem för forskning. The Lancet. Neurology, 23(2), 178–190. https://doi.org/10.1016/S1474-4422(23)00405-2 

  1. Höglinger, GU, Adler, CH, Berg, D., Klein, C., Outeiro, TF, Poewe, W., Postuma, R., Stoessl, AJ, & Lang, AE (2024). En biologisk klassificering av Parkinsons sjukdom: SynNeurGe-forskningens diagnostiska kriterier. The Lancet. Neurology, 23(2), 191–204. https://doi.org/10.1016/S1474-4422(23)00404-0 

  1. Bayer TA. Proteinopatier, ett kärnkoncept för att förstå och slutligen behandla degenerativa sjukdomar? Eur Neuropsychopharmacol [Internet]. 2015 1 maj [hänvisad 2024 feb 18];25(5):713–24. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23642796/ 

  1. McCann H, Stevens CH, Cartwright H, Halliday GM. α-Synukleinopati-fenotyper. Parkinsonism Relat Disord. 2014 1 januari;20(SUPPL.1):S62–7. 

  1. Concha-Marambio L, Pritzkow S, Shahnawaz M, Farris CM, Soto C. Fröamplifieringsanalys för detektion av patologiska alfa-synukleinaggregat i cerebrospinalvätska. Nature Protocols 2023 18:4 [Internet]. 2023 jan 18 [hänvisad 2023 nov 12];18(4):1179–96. Tillgänglig från: https://www.nature.com/articles/s41596-022-00787-3 

  1. Shahnawaz M, Tokuda T, Waraga M, Mendez N, Ishii R, Trenkwalder C, et al. Utveckling av en biokemisk diagnos av Parkinsons sjukdom genom detektion av felveckade α-synukleinaggregat i cerebrospinalvätska. JAMA Neurol [Internet]. 2017 1 feb [hänvisad 2023 sep 24];74(2):163–72. Tillgänglig från: https://jamanetwork.com/journals/jamaneurology/fullarticle/2588684 

  1. Shahnawaz M, Mukherjee A, Pritzkow S, Mendez N, Rabadia P, Liu X, et al. Att skilja α-synukleinstammar vid Parkinsons sjukdom och multipel systematrofi. Nature [Internet]. 2020 13 feb [hänvisad 2023 nov 23];578(7794):273–7. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32025029/ 

  1. El-Agnaf OMA, Salem SA, Paleologou KE, Cooper LJ, Fullwood NJ, Gibson MJ, et al. α-Synuklein som är involverat i Parkinsons sjukdom finns i extracellulära biologiska vätskor, inklusive mänsklig plasma. The FASEB Journal [Internet]. 2003 1 oktober [hänvisad 2024 18 februari];17(13):1–16. Tillgänglig från: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1096/fj.03-0098fje 

  1. Kuzkina A, Bargar C, Schmitt D, Rößle J, Wang W, Schubert AL, et al. Diagnostiskt värde av hud-RT-QuIC vid Parkinsons sjukdom: en tvålaboratoriestudie. npj Parkinson's Disease 2021 7:1 [Internet]. 2021 15 nov [hänvisad 2023 22 nov];7(1):1–11. Tillgänglig från: https://www.nature.com/articles/s41531-021-00242-2 

  1. De Luca CMG, Elia AE, Portaleone SM, Cazzaniga FA, Rossi M, Bistaffa E, et al. Effektiv RT-QuIC-såddaktivitet för α-synuklein i luktslemhinneprover från patienter med Parkinsons sjukdom och multipel systematrofi. Transl Neurodegener [Internet]. 2019 8 aug [hänvisad 2023 nov 22];8(1):1–14. Tillgänglig från: https://translationalneurodegeneration.biomedcentral.com/articles/10.1186/s40035-019-0164-x 

  1. Mayo Clinic. Parkinsons test (α-Synuklein seed amplification assay) - Mayo Clinic [Internet]. 2023 [hänvisad 2024 februari 18]. Tillgänglig från: https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/parkinsons-testing-alpha-synuclein-seed-amplification/about/pac-20556191 

  1. Siderowf A, Concha-Marambio L, Lafontant DE, Farris CM, Ma Y, Urenia PA, Nguyen H, Alcalay RN, Chahine LM, Foroud T, Galasko D, Kieburtz K, Merchant K, Mollenhauer B, Poston KL, Seibyl J, Simuni T, Tanner CM, Weintraub D, Videnovic A, Choi SH, Kurth R, Caspell-Garcia C, Coffey CS, Frasier M, Oliveira LMA, Hutten SJ, Sherer T, Marek K, Soto C; Parkinson's Progression Markers Initiative. Bedömning av heterogenitet bland deltagare i Parkinson's Progression Markers Initiative-kohorten med hjälp av α-synukleinfröamplifiering: en tvärsnittsstudie. Lancet Neurol. Maj 2023;22(5):407-417. doi: 10.1016/S1474-4422(23)00109-6. PMID: 37059509; PMCID: PMC10627170. 

  1. Gilboa T, Swank Z, Thakur R, Gould RA, Ooi KH, Norman M, et al. Mot kvantifiering av α-synukleinaggregat med digitala fröamplifieringsanalyser. Proc Natl Acad Sci USA [Internet]. 2024 jan 16 [hänvisad 2024 feb 18];121(3). Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38194461/ 

  1. Postuma RB. Prodromal Parkinsons sjukdom – Användning av REM-sömnbeteendestörning som ett fönster. Parkinsonism Relat Disord. 2014 1 januari;20(SUPPL.1):S1–4. 

  1. Concha-Marambio L, Weber S, Farris CM, Dakna M, Lang E, Wicke T, et al. Noggrann detektion av α-synukleinfrön i cerebrospinalvätska från isolerad Rapid Eye Movement Sleep Behavior Disorder och patienter med Parkinsons sjukdom i DeNovo Parkinson (DeNoPa) Cohort. Mov Disord [Internet]. 2023 1 april [hänvisad 2024 feb 18];38(4):567–78. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36781413/ 

  1. Fernandes Gomes B, Farris CM, Ma Y, Concha-Marambio L, Lebovitz R, Nellgård B, et al. α-Synukleinfröamplifieringsanalys som ett diagnostiskt verktyg för parkinsonistiska sjukdomar. Parkinsonism Relat Disord [Internet]. 2023 dec 1 [hänvisad 2024 feb 19];117. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37591709/ 

  1. Iranzo A, Fairfoul G, Ayudhaya ACN, Serradell M, Gelpi E, Vilaseca I, et al. Detektion av α-synuklein i CSF med RT-QuIC hos patienter med isolerad RAPS-sömnstörning: en longitudinell observationsstudie. Lancet Neurol [Internet]. 2021 mars 1 [hänvisad 2023 september 24];20(3):203–12. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33609478/ 

  1. Manne S, Kondru N, Jin H, Anantharam V, Huang X, Kanthasamy A, et al. α-Synuklein realtidsskakningsinducerad omvandling i submandibulära körtlar hos patienter med Parkinsons sjukdom. Mov Disord [Internet]. 2020 1 feb [hänvisad 2023 nov 22];35(2):268–78. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31758740/ 

  1. Majbour N, Aasly J, Abdi I, Ghanem S, Erskine D, Van De Berg W, et al. Sjukdomsassocierade α-synukleinaggregat som biomarkörer för Parkinsons sjukdoms kliniska stadium. Neurology [Internet]. 2022 november 22 [hänvisad 2023 juni 11];99(21):E2417–27. Tillgänglig från: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36096686/